无菌室，也叫作接种室，是一种专用于系统接种、纯化菌种等无菌操作的实验室。无菌室灭菌的目的是规范无菌室检验工作的质量控制，确保检验结果准确可靠。那么，无菌室如何灭菌呢?接下来本文就来介绍一下无菌室灭菌消毒方法。

常用的无菌室灭菌方法有哪些?

　　通常有三种无菌室灭菌方法，即紫外线照射、臭氧灭菌、化学熏蒸。

　　1、紫外线照射。

　　紫外线杀菌是一种物理杀菌方法，是利用适当波长的紫外线破坏微生物体细胞中的DNA或RNA结构，导致生长细胞死亡，从而达到灭菌的效果，这也是微生物检测无菌室非常常用的杀菌方法。紫外线杀菌方法操作简单，使用方便且经济，能够杀死各种微生物，包括细菌、病毒、真菌、立克次体和支原体。因此，紫外线杀菌是实验室中见的最多的杀菌方法。

　　然而，紫外线消毒也有一些缺点。紫外线只能杀死直接暴露的微生物，因此只能杀死空间中照射到的地方。对于一些无法暴露的死角或物体内部无法达到效果。此外，紫外线杀菌应定期检测，不然会影响无菌室灭菌效果。

　　2、臭氧灭菌。

　　臭氧是一种强氧化剂，灭菌过程是一种生化氧化反应。O3灭菌的原理一般有三种：

　　(1)臭氧通过氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶，杀死细菌。

　　(2)直接影响细菌.病毒，破坏细胞器和DNA.RNA，破坏细菌的代谢，导致细菌死亡。

　　(3)通过细胞膜组织，作用于细胞膜中的脂蛋白和脂多糖，改变细胞的渗透性，导致细胞溶解死亡。

　　使用臭氧灭菌，彻底杀菌，无残留，能够够杀灭细菌繁殖体和芽孢、病毒、真菌等，并能破坏肉毒杆菌毒素。此外，O3对霉菌也有很强的杀灭作用。O3是一种气体，可以快速扩散到整个杀菌空间，灭菌没有死角。臭氧灭菌也是目前广泛使用的一种杀菌方法。用臭氧对空气进行消毒，必须在封闭空间和无人在室内进行，消毒后至少30分钟才能进入。此外，臭氧的密度大于空气的密度，在空气中会迅速下降到空间的底部。因此，臭氧发生器需安装在无菌室的顶部。无菌室灭菌时间为30分钟，要求空间中臭氧浓度不低于20mg/m3。

　　3、化学熏蒸。

　　化学熏蒸是一种非常传统的空间灭菌方法，它的目的是用挥发性化学物质的蒸汽杀死空间微生物，一般常用甲醛、戊二醛、过氧化氢、过氧乙酸等。

　　这里以常用的甲醛熏蒸为例。甲醛熏蒸，也叫作甲醛高锰酸钾熏蒸，在高锰酸钾溶液中加入40%的甲醛溶液。两者发生反应，释放大量热量，使甲醛蒸发到空间中，从而对无菌室进行消毒。一般来说，甲醛熏蒸的杀菌效果比较理想，对霉菌等难以清除的污染细菌也有很好的杀菌效果。因此，当无菌室被霉菌污染时，通常使用甲醛熏蒸来完全消除污染源。

　　由于甲醛是一种致癌性很强的化学物质，对人体危害很大，因此在使用过程中格外注意，严格控制残留量。在每次熏蒸后，至少需要通风24小时。

　　目前，这种无菌室灭菌方法经常用于许多制药企业。此外，若是一些生产区域长期受到霉菌污染，也会考虑使用甲醛熏蒸法。

　　以上是无菌室灭菌的三种方法及优缺点介绍，大家可以根据自身情况进行选择合适的方法。

无菌室工作注意事项

　　1.无菌室灭菌。每次使用前打开紫外线灯照射30分钟以上，或使用前30分钟，内外室喷洒5%石炭酸。

　　2.用肥皂洗手后，将所需设备搬到室外。在室外换上消毒过的工作服、工作帽和工作鞋，戴上口罩，然后用2%煤酚皂液浸泡洗手2分钟。

　　3.将各种需要的物品移入内室清点到位，用5%石炭酸在工作台和操作人员站位上方的空间喷洒，返回外室，5到10分钟后进入内室工作。

　　4.接种前，用70%酒精棉球擦拭手部。进行无菌作业时，动作要轻柔，尽量减少空气波动和地面扬尘。

　　5.工作时注意安全。如果棉花塞着火，用湿布包裹并熄灭。不要用嘴吹气以避免燃烧。如果真菌培养物散落或破碎，用浸泡在5%石炭酸中的抹布包裹，用浸泡在5%石炭酸中的抹布擦拭桌子或地面，用酒精棉球擦拭手，然后继续操作。

　　6.工作结束后，立即清理台面，取出无菌室内不应存放的所有物品和废弃物，在无菌室内喷洒5%石炭酸或打开紫外线灯30分钟。

　　综上所述就是关于无菌室灭菌方法及工作注意事项的相关介绍，希望大家能有所收获。